ptr-MIR156a启动子克隆及特征分析

doi:10.3969/j.jssn.1000-2006.2011.06.001

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南京林业大学学报（自然科学版） ›› 2011, Vol. 35 ›› Issue (06): 1-5.doi: 10.3969/j.jssn.1000-2006.2011.06.001

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ptr-MIR156a启动子克隆及特征分析

陈英,王浩然,许庆,黄敏仁*

南京林业大学杨树种质创新与品种改良重点实验室，江苏南京210037

出版日期:2011-11-28 发布日期:2011-11-28
基金资助:
收稿日期：2011-07-19修回日期：2011-09-19基金项目：国家林业局林业公益性行业科研专项项目（200904048）作者简介：陈英(1973—)，副教授。*黄敏仁（通信作者），教授。Email: njmrhuang@njfu.cn。

Clone and characterization of ptr-MIR156a promoter in Populus trichocarpa

CHEN Ying,WANG Haoran,XU Qing,HUANG Minren*

Poplar Germplasm Enhancement & Variety Improvement Lab, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China

Online:2011-11-28 Published:2011-11-28

摘要/Abstract

摘要： miR156a在火炬松、烟草、拟南芥中的表达与病原菌侵染密切相关。为了研究miR156a在杨树与病原菌互作过程中分子机制，以毛果杨全基因组DNA为材料，预测ptr-MIR156a启动子的大概区域，设计特异性PCR引物，克隆了ptr-MIR156a上游启动子区500、1 000和1 500 bp片段，并进行顺式作用元件分析，然后分别构建了绿色荧光蛋白（GFP）报告基因植物表达载体，最后通过原生质体的瞬时表达体系对其进行了活性检测。结果表明，1 500 bp片段活性最高，1 000 bp片段次之，500 bp片段活性最低。

Abstract: MicroRNAs (miRNAs) are endogenous small RNAs that have large regulatory effects development and stress responses in plants. Recently studies show that the expression of miR156a is intensively related with pathogens infection in Loblolly pine, tobacco, Arabidopsis and maize. To understand the interaction mechanism between miR156a and poplar, we predicted ptr-MIR156a promoter region and amplified three upstreaming fragments of ptr-MIR156a from Populus trichocarpa, 500 bp, 1 000 bp, and 1 500 bp, respectively，analyzed their cisacting elements, then cloned them into plant expression vectors, pMDC83 and transferred into poplar protoplasts. Fluorescence results showed that they drove GFP gene expression at different levels. Based on this result, we could transfer theses fragments into plants and study ptr-miR156a expression patterns and regulation mechanism in the future.

中图分类号:

S722

陈英,王浩然,许庆,等. ptr-MIR156a启动子克隆及特征分析[J]. 南京林业大学学报（自然科学版）, 2011, 35(06): 1-5.

CHEN Ying,WANG Haoran,XU Qing,HUANG Minren*. Clone and characterization of ptr-MIR156a promoter in Populus trichocarpa[J].Journal of Nanjing Forestry University (Natural Science Edition), 2011, 35(06): 1-5.DOI: 10.3969/j.jssn.1000-2006.2011.06.001.

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