南京林业大学学报(自然科学版) ›› 2010, Vol. 34 ›› Issue (01): 1-4.doi: 10.3969/j.jssn.1000-2006.2010.01.001

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百合花发育相关基因LLGLO1的RNAi载体构建

席梦利,刘坡,吴小萍,施季森*   

  1. 南京林业大学,林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室,江苏南京210037)
  • 出版日期:2010-02-09 发布日期:2010-02-09
  • 基金资助:
    收稿日期:2009-03-26修回日期:2009-05-15基金项目:江苏省高校自然科学重大基础研究项目(07KJA210019);国家自然科学基金项目(30972407)作者简介:席梦利(1970—),副教授,博士。*施季森(通信作者),教授。Email: jshi@njfu.edu.cn。引文格式:席梦利,刘坡,吴小萍,等. 百合花发育相关基因LLGLO1的RNAi载体构建[J]. 南京林业大学学报:自然科学版,2010,34(1):1-4.

Construction of RNAi vector of LLGLO1 gene related to flower development of Lilium

XI Mengli, LIU Po, WUXiaoping, SHIJisen*   

  1. Key Laboratory of Forest Genetics and Biotechnology Ministry of Education, Nanjing Forestry University,Nanjing 210037, China
  • Online:2010-02-09 Published:2010-02-09

摘要: 百合花发育相关基因的研究是开展花卉分子育种的重要基础。以麝香百合(Lilium longiflorum Thumb.)未开放的花蕾为材料提取总RNA。根据LLGLO1序列的同源比对选取特异区段,设计引物扩增区段cDNA并引入酶切位点。将PCR扩增片断连接到T载体上,经酶切及PCR验证后进行测序。测序结果表明:用于RNAi的cDNA片断与LLGLO1序列完全相同。通过中间载体pSK+intron引入一段内含子间隔区,RNA干扰片断经过多次的酶切和连接过程最终连入表达载体pCAMBIA1301中形成ihpRNA结构。PCR及双酶切鉴定结果显示,构建的RNA干扰载体的ihpRNA结构完整。

中图分类号: